转基因猪免受经典猪瘟病毒感染

动保频道 2019-01-15 10:01:04

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该研究表明,CRISPR / Cas9技术和RNA干扰技术联合为生产具有改善的抗病毒感染的转基因动物提供了可能。

由经典猪瘟病毒(CSFV)引起的经典猪瘟(CSF)是危害最大的疾病之一,从而给养猪业带来了巨大的经济损失。尽管许多政府当局都努力在猪群中根除该病,但其仍然普遍存在。

本研究选择抗病毒小发夹RNA(shRNA),然后通过CRISPR / Cas9介导的基因敲入技术插入猪Rosa26(pRosa26)位点。最后,通过体细胞核移植(SCNT)生产抗CSFV的转基因(TG)猪。

我们通过“接触式”感染模式进行动物攻毒实验。随后将猪随机分饲于两个独立的猪舍,每个猪舍包括1头使用CSFV感染的非转基因猪(NTG-In),3 头非转基因猪(NTG)和3 头转基因猪(TG)。适应3天后,通过肌内注射对NTG-In猪进行CSFV攻毒,而未对同圈其它猪进行攻毒,故可模拟CSFV通过接触的自然传播。在感染过程中,每天监测并记录攻毒猪中与CSFV相关的临床症状(包括嗜睡和出血),死亡率和病毒血症。结果表明,所有NTG猪均表现出典型的CSFV感染症状,死亡率为100%。尽管在TG猪中也观察到CSFV相关的临床症状,但并不严重,且TG猪的病毒水平低于NTG猪。

值得注意的是,体外和体内病毒攻毒试验进一步证明了TG猪可以有效地限制CSFV的复制并降低CSFV相关的临床症状和死亡率,并可将抗病性稳定地传递给F1代。

总而言之,我们的研究表明, CRISPR / Cas9技术和RNA干扰(RNAi)技术相结合为生产具有改善的抗病毒感染的转基因动物提供了可能性。

使用这些转基因猪可减少经典猪瘟相关的经济损失,这种抗病毒策略可能对未来的抗病毒研究有用。

Xie Z, Pang D, Yuan H, Jiao H, Lu C, Wang K, et al. (2018) Genetically modified pigs are protected from classical swine fever virus. PLoS Pathog 14(12): e1007193. https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1007193

(文章来源:Pig333)


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